dynamické riešenie normalizácie BIOSENSORS heliXcyto
Kľúčové vlastnosti
- Na normalizáciu fluorescenčných signálov na Spot 1 a Spot 2 heliX cyto čipu
- Umožňuje správne odkazovanie na červené alebo zelené fluorescenčné signály v reálnom čase počas meraní RT-IC
- Kompatibilné so všetkými heliX cyto čipmi
- Normalizačný roztok-Ra nesie stredne hydrofilné červené farbivo s jediným kladným čistým nábojom
- Normalizačný roztok-Ga nesie hydrofilné zelené farbivo s jediným záporným čistým nábojom
Popis produktu
Číslo objednávky: NOR-0
Tabuľka 1. Informácie o obsahu a ukladaní
| Materiál | Čiapka | Koncentrácia | Suma | Skladovanie |
| Normalizačný roztok-Ra | Oranžová | 10 uM | 3 x 100 ul | -20 °C |
| Normalizačný roztok-Ga | Zelená | 10 uM | 3 x 100 ul | -20 °C |
Len na výskumné použitie.
Tento produkt má obmedzenú trvanlivosť, pozrite si dátum exspirácie na štítku.
Príprava
Vyberte farbu normalizačného roztoku (Ga alebo Ra) zodpovedajúcu farbe štítku analytu. Zrieďte 10 uM normalizačný zásobný roztok na pracovnú koncentráciu s bežiacim pufrom.
Konečný objem potrebný na experiment možno nájsť v heliOS sample zásobník view testu.
Koncentrácia normalizačného roztoku by mala približne zodpovedať koncentrácii fluorofóru pri najvyššej koncentrácii analytu, ktorá sa má merať. Dá sa to vypočítať pomocou nasledujúcej rovnice:
: Koncentrácia normalizačného roztoku v požadovanej farbe
: Koncentrácia farbiva v roztoku značeného analytu
: Najvyššia koncentrácia analytu, ktorá by sa mala merať
: Stupeň značenia (pomer farbiva k analytu)
Zriedené roztoky možno skladovať pri teplote 2 – 8 °C až 7 dní.
DÔLEŽITÉ: Nemiešajte spolu normalizačný roztok-Ra a normalizačný roztok-Ga, pokiaľ nenastavujete meranie Dual Color (paralelné odčítanie zeleného a červeného kanála).
Aplikačná poznámka
Pri meraní RT-IC by fluorescenčný signál normalizačného roztoku mal byť v a podobný rozsah ako najvyšší signál pochádzajúci z viazaného analytu (nespracované údaje).
Absolútny fluorescenčný signál je závislý od koncentrácie normalizačného roztoku a excitačnej sily použitej pri meraní. Budiaci výkon je potrebné zvoliť na základe nasledujúceho parametra:
a. Koncentrácia fluoroforov v roztoku analytu:
Koncentrácia fluorofóru závisí od koncentrácie analytu použitej pri meraní, ako aj od stupňa označenia analytu. Pre vysoké DOL a vysoké koncentrácie analytu môže byť potrebné zníženie excitačnej sily.
b. Očakávaný väzbový signál:
Vysoko exprimované ciele na bunke môžu viazať viac molekúl značeného analytu. V prípade vysoko nadmerne exprimovaných cieľov možno očakávať silný väzbový signál. Aby sa predišlo zatváraniu uzávierky, môže sa zvážiť zníženie budiaceho výkonu.
c. Typ čipu:
Rôzne typy čipov majú rôzne fluorescenčné pozadie. Čím väčšie pasce a čím viac pascí na čipe, tým vyšší je signál pozadia. Čipy L5 preto môžu vyžadovať nižší budiaci výkon ako čipy M5.
Pre východiskový bod excitačného výkonu a normy. koncentrácia roztoku, ktorá sa má použiť v experimente RT-IC, pozrite si tabuľku 2.
Tabuľka 2. Vzťah koncentrácie fluorofóru, koncentrácie normalizačného roztoku a excitačného výkonu vhodného pre čip heliX cyto M5
| Analytové farbivo konc. = konc analytu x DOL | Excitačná sila | Roztok na normalizáciu koncentrácie | Roztok na normalizáciu riedenia |
| 25 nM | 0.5 | 25 nM | 1:400 |
| 50 nM | 0.3 | 50 nM | 1:200 |
| 100 nM | 0.2 | 100 nM | 1:100 |
| 300 nM | 0.1 | 300 nM | 1:33 |
| 500 nM | 0.08 | 500 nM | 1:20 |
| 1 uM | 0.05 | 1 uM | 1:10 |
| 2.5 uM | 0.02 | 2.5 uM | 1:4 |
Poznámka: Táto tabuľka slúži pre vašu orientáciu. Konečný signál zaznamenaný v heliX cyto však závisí od mnohých faktorov. Pre každý systém bude teda potrebná určitá optimalizácia.
Kontaktovať
| Dynamic Biosensors GmbH | Dynamic Biosensors, Inc. |
| Perchtinger Str. 8/10 | 300 Trade Center, Suite 1400 |
| 81379 Mníchov | Woburn, MA 01801 |
| Nemecko | USA |
Informácie o objednávke order@dynamic-biosensors.com
Technická podpora support@dynamic-biosensors.com
ZÁKAZNÍCKA PODPORA
www.dynamic-biosensors.com
Nástroje a čipy sú navrhnuté a vyrobené v Nemecku.
©2024 Dynamic Biosensors GmbH | Dynamic Biosensors, Inc. Všetky práva vyhradené.
Dokumenty / zdroje
 |
dynamické riešenie normalizácie BIOSENSORS heliXcyto [pdfPoužívateľská príručka NOR-0, normalizačný roztok heliXcyto, heliXcyto, normalizačný roztok, roztok |
